Aislamiento, identificación molecular y caracterización de levaduras nativas en la producción de XilitolTrabajo de Grado / PDF-Archivos Legibles por Computador
Tesis (Ingeniero Agroindustrial) -- Universidad de San Buenaventura. Facultad de Ingeniería, Cali, 2022 Documento disponible en Repositorio Institucional (10501)
Este trabajo busca caracterizar e identificar cepas de levaduras nativas obtenidas de bebidas fermentadas en el laboratorio de microbiología de la Universidad San Buenaventura Cali que puedan ser utilizadas en la producción de xilitol a partir de xilosa. Se realizó el aislamiento de las levaduras para posteriormente desarrollar la metodología buscando la caracterización de las colonias levaduriformes y la morfología específica de las levaduras obtenidas, esto mediante el uso de la microscopía convencional. Para la identificación bioquímica se realizaron siembras en medios de cultivo específicos y posteriormente los resultados fueron relacionados en la clave de identificación de pruebas bioquímicas para identificar el género de las levaduras. La identificación molecular se realizó en el laboratorio de investigación de la Universidad San Buenaventura Cali utilizando para la extracción de ADN el kit Soil DNA Isolation Plus Kit, el ADN se replicó por medio de la técnica de PCR y se envió a MacroGen (Korea), para su posterior secuenciación. La alineación de la secuencia de las cepas levaduriformes se realizó con el software BLAST, mediante el cual se identificó el género y la especie de las levaduras experimentales aisladas.
Se evaluó la capacidad de las levaduras nativas de producir xilitol, se preparó un medio de cultivo rico en xilosa. Luego de haberse fermentado, se realizó análisis por medio de una cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), pudiendo determinar las proporciones de cada componente, a partir de la cual se obtuvo el xilitol además de la concentración de este polialcohol en el fermentado.
